维生素D受体基因多态性和乙型肝炎病毒与胰腺癌的相关研究

【摘要】研究背景随着医疗技术的进步,部分恶性肿瘤的治疗和预后得到了极大改善,但是胰腺癌的治疗和预后仍然处于另一种相对不同的情况。根据最新统计数据,世界范围内胰腺癌死亡率在总癌症死亡率中占第8位,发达国家中占总癌症死亡率的第4位,每年约有266000人死于胰腺癌,并且大部分病人在确诊后的一年内死亡。胰腺位于腹膜后间隙造成胰腺癌早期症状隐匿,直到患者出现明显症状而确诊时疾病多已处于进展期。胰腺癌的预后很大程度上与肿瘤分期有关,早期病人术后5年生存率已经达到20%左右,但是总体的5年生存率仍然不足5%。因此针对胰腺癌危险因素的一级预防在整个疾病的防治中尤为重要。目前认为导致个体罹患胰腺癌的因素大体分为两类：一种是基因因素。关于基因多态性与胰腺癌的关系,人们做了相当深入的研究,也发现了某些基因多态性与胰腺癌的发病风险存在相关性。既往研究显示维生素D(VitaminD,VD)在体外实验中可以明显抑制胰腺癌细胞的增殖以及口服补充VD的剂量或接受日光照射时间长短与胰腺癌的发病风险相关。但是关于维生素D受体(VitaminDreceptor,VDR)基因多态性与胰腺癌的关系的研究仍非常有限。另一种是环境及后天生理病理因素,如吸烟、饮酒、肥胖、糖尿病以及慢性胰腺炎等。近5年来关于乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)与胰腺癌相关性的研究逐渐成为胰腺癌流行病学的一个热点,但是不同研究的结果存在争议。我们在进行病例对照研究的基础上汇总既往文献报道结果更新meta分析结果以进一步探讨两者之间的关系。本课题以济南为中心的山东地区胰腺癌病人和健康人群为研究对象,采用适宜的试验方法,对VDR基因rs2228570、rs1544410位点多态性和HBV与胰腺癌发病风险的相关性进行了研究,同时分别探讨VDR基因多态性和HBV与胰腺癌发生部位、疾病分期和病理分化程度的相关性。第一部分维生素D受体基因rs2228570、rs1544410多态性与胰腺癌的相关研究VDR作为一种亲核蛋白受体,广泛分布于体内各组织细胞中。早期研究发现VDR在体内的生物学作用主要是经典的钙磷平衡调节作用,随着近年来研究的不断深入,相关结果显示VDR还具有调节细胞周期、抑制细胞增殖及促进细胞分化和凋亡的作用。基于以上研究,VDR的表达以及VDR基因多态性与癌症的研究成为近十年来的研究热点之一。目前的研究结果显示VDR表达与人类癌细胞株的分化程度有关,对多种组织来源的癌细胞如人前列腺癌细胞、乳腺癌细胞、皮肤癌细胞以及胰腺癌细胞具有调节生长、分化的作用,同时对抑制癌细胞等方面有调节作用。为了进一步探讨VDR基因多态性与胰腺癌的关系,我们设计了本部分研究来分析VDR基因多态性与胰腺癌的发病风险、肿瘤发生部位、疾病分期和癌细胞分化的关系。目的与方法本研究中探讨VDR基因rs2228570、rs1544410位点多态性与胰腺癌的关系。病例组为经病理确诊为胰腺腺癌的患者,对照组为健康查体人群,病例组共258人、对照组385人,病例组与对照组为1：1.5。我们应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerasechainreactionandrestrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)技术测定VDR基因rs2228570、rs1544410多态性等位基因以及基因型的频数,并进行单因素以及多因素逻辑回归分析来研究不同等位基因、基因型与胰腺癌发病风险的关系；此外,通过应用列联表分析来检验基因型频率与胰腺癌发生部位、疾病分期和肿瘤分化程度的关系。结果1.rs2228570单核苷酸位点与胰腺癌的关系分别进行单因素回归分析和调整年龄、性别、吸烟史、饮酒史及糖尿病等混杂因素的多因素回归分析,结果显示：rs2228570基因多态性中TT基因型与胰腺癌发病风险显著相关(单因素：OR=3.024,95%CI=1.919～4.764,P=0.005:多因素：AOR=2.978,95%CI=1.844～4.81,P=0.0006):携带至少一个T等位基因的CT+TT基因型胰腺癌患病风险显著增加(单因素：OR=2.424,95%CI=1.718～3.420,P=0.001:多因素：AOR=1.995,95%CI=1.311～3.035,P=0.0013);T等位基因与胰腺癌发病风险显著相关(OR=1.869,95%CI=1.489～2.347,P=0.0001)。将胰腺癌按高分化、中分化、低分化分组,将胰腺癌分化程度与rs2228570多态性基因型频率进行列联表分析,结果显示rs2228570基因多态性与胰腺癌分化程度显著相关(P=0.006,χ2=19.7208)。2.rs1544410基因多态性与胰腺癌的关系分别进行单因素回归分析和调整年龄、性别、吸烟史、饮酒史及糖尿病等混杂因素的多因素回归分析,结果显示：至少含有一个G等位基因的AG+GG基因型与胰腺癌患病风险呈负相关(单因素：OR=0.631,95%CI=0.449～0.887,P=0.008;多因素：AOR=0.648,95%CI=0.453-0.928,P=0.0179)；G等位基因与胰腺癌发病风险呈负相关且有明显统计学意义(OR=0.756,95%CI=0.603～0.947,P=0.015);单独分析AG、GG基因型,未见明显相关性。胰腺癌按TNM分期分为I～Ⅳ期,将胰腺癌分期与rs1544410多态性基因型频率进行列联表分析,结果显示rs1544410基因多态性与胰腺癌分期相关性有明显统计学意义(P=0.0148,χ2＝15.8179)。结论1.VDR基因多态性与个体罹患胰腺癌的风险之间存在显著相关性。rs2228570位点突变纯合子可以导致胰腺癌发病风险增加,突变位点T以及携带至少一个T位点的基因型与胰腺癌发病风险增加有关；rs1544410突变基因位点G则可以降低胰腺癌的发病风险。2.VDR基因多态性与胰腺癌的病理分化、疾病分期等临床特征相关,从而可能影响疾病的预后。第二部分乙型肝炎病毒与胰腺癌相关性的研究以及更新meta分析慢性HBV感染是指感染HBV超过6个月,机体未彻底清除病毒的感染状态。慢性HBV感染可以有明确的急性乙肝病史,也可能由于婴幼儿时期感染HBV,由于当时免疫系统尚未健全无法清除病毒而导致病毒潜伏于机体。近年来关于隐匿性HBV携带状态的研究逐渐增多,临床多以乙肝表面抗原阴性而乙肝核心抗体阳性为特点。我国慢性HBV流行率约为7%,相比较全球感染情况,我国所面临由HBV引起的公共卫生威胁更加严重。近年来的研究表明HBV除定植于肝组织中外,也可以定植于肝外组织比如肾脏、皮肤和胰腺组织中,既往已有数个队列研究和病例对照研究探讨HBV是否可能增加胰腺癌的发病风险,但不同研究所得的结果存在争议。本部分研究中包括胰腺癌病人与健康对照组的病例对照研究；结合病例对照研究结果并汇总以前发表的关于HBV与胰腺癌的研究结果进行的meta分析更新,以进一步探讨HBV与胰腺癌的关系。目的与方法病例对照研究中,病例组为收集的胰腺腺癌病人,对照组为健康查体人群。病例组258人、对照组385人,病例组与对照组为1：1.5。课题中收集了病例组和对照组人群的HBV携带状态、年龄、性别、吸烟史、饮酒史以及糖尿病等临床特征,进行单因素以及多因素逻辑回归分析来研究HBV与胰腺癌发病风险的关系；并结合以上分析结果同时汇总2013年6月以前关于HBV与胰腺癌的研究结果更新meta分析以进一步检验两者之间的相关性；此外,通过应用列联表分析来检验HBV与胰腺癌发生部位、分期和分化程度的关系。结果1.HBV与胰腺癌发病风险的分析回归分析结果显示：乙肝表面抗原阳性组胰腺癌发病风险显著增加(单因素：OR=2.380,95%CI=1.556～3.606,P=0.001;多因素：AOR=3.339,95%CI=2.081～5.358,P=0.001),根据HBV血清学标志物分层研究结果显示HBsAg+/antiHBcAb+组与胰腺癌发病风险显著相关(单因素：OR=3.375,95%CI=1.915～5.950,P=0.001;多因素：AOR=3.864,95%CI=2.057-7.255P=0.0032)；多因素分析显示隐匿性HBV携带组(HBsAg-/antiHBcAb+组)胰腺癌发病风险明显增加(AOR=1.163,95%CI=0.774～1.747,P=0.031)。meta分析结果显示HBV可以显著增加胰腺癌发病风险(OR=1.392,95%CI=1.167～1.660,P=0.00),亚组分析时队列研究meta亚组分析结果处于临界统计学意义(OR=1.307,95%CI=0.966-1.715,P=0.053)。2.HBV与胰腺癌部位、分期以及分化程度的关系将胰腺癌按高分化、中分化、低分化分组,将胰腺癌分化程度与HBV相关各组进行列联表分析,结果显示HBV与胰腺癌分化程度显著相关(P=0.001,χ2=37.4118)结论1.研究结果提示慢性HBV感染可显著增加胰腺癌的发病风险,隐匿性HBV携带与胰腺癌的发病风险明显相关。以上结论需要进一步多中心、大样本的研究以及不断更新的meta分析进行检验。2.HBV与胰腺癌的病理分化程度相关,从而可能影响胰腺癌疾病的预后。
【作者】李磊；
【导师】刘吉勇；
【作者基本信息】山东大学，内科学（专业学位），2014，博士
【关键词】维生素D受体；基因多态性；乙型肝炎病毒；胰腺癌；

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